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梯度(dù)液相色(sè)譜(pǔ)儀梯度(dù)洗(xǐ)脫(tuō)時(shí)為(wéi)何產生“鬼峰(fēng)”

 更(gēng)新(xīn)時間(jiān):2021-09-22 點(diǎn)擊量:4679
   梯度(dù)液相色(sè)譜(pǔ)儀是(shì)目(mù)前(qián)應(yīng)用較(jiào)多的(dí)色譜(pǔ)分析(xī)方法,液相色(sè)譜(pǔ)係統由(yóu)流動(dòng)相(xiāng)儲液體瓶,輸(shū)液泵,進(jìn)樣(yàng)器,色譜柱,檢(jiǎn)測器(qì)和(hé)記錄(lù)器組成,其整(zhěng)體組成(chéng)類似(sì)於氣相(xiāng)色譜,針(zhēn)對其流動(dòng)相(xiāng)為(wéi)液體(tǐ)的特點(diǎn)作(zuò)出很多調(tiáo)整。
  梯度(dù)洗脫(tuō)帶來(lái)的“鬼峰”來源很多(duō),其(qí)中(zhōng)主要(yào)來(lái)源於流動相(xiāng)和(hé)管(guǎn)路,幾乎都有(yǒu)一個(gè)共(gòng)同(tóng)的(dí)機(jī)製:
  當(dāng)流動相(xiāng)具有(yǒu)較高(gāo)的(dí)洗(xǐ)脫強(qiáng)度(dù)時,流(liú)動(dòng)相(xiāng)中(zhōng)有(yǒu)紫外(wài)吸(xī)收(shōu)的有機雜質在(zài)柱上聚焦(jiāo)成(chéng)組(zǔ)分帶,並(bìng)隨後(hòu)在(zài)梯(tī)度(dù)中洗(xǐ)脫。這些(xiē)流動(dòng)相雜質(zhì)的(dí)潛在(zài)“來源”是廣(guǎng)泛(fàn)的(dí)(如有(yǒu)機(jī)相(xiāng)中汙染物,水相中(zhōng)汙染(rǎn)物(wù),緩衝鹽類(lèi),流動(dòng)相瓶和(hé)混(hùn)合過程(chéng)產生(shēng)等(děng))。其他(tā)原因包括(kuò)流動相(xiāng)輸(shū)送(sòng)的物理(lǐ)或機(jī)械方麵,樣(yàng)品(pǐn)引入和固定相(xiāng)效應。各(gè)種來源(yuán)的鬼峰,讓(ràng)鬼峰(fēng)處理變得非常困難。
  在色譜分(fēn)離(lí)中(zhōng),縱向擴散(sàn)會增(zēng)加(jiā)分離組分帶(dài)寬。等度液相(xiāng)色(sè)譜中,盡量(liáng)在縱(zòng)向擴散超出接受範圍(wéi)之(zhī)前洗(xǐ)脫(tuō)。在(zài)梯(tī)度(dù)洗脫色譜,因為流動相(xiāng)配(pèi)比(bǐ)的變(biàn)化(huà)導致動(dòng)態壓(yā)縮組分(fēn)帶的主動聚焦(jiāo)機製(zhì)(帶/峰壓(yā)縮(suō))。梯(tī)度色(sè)譜運(yùn)行(háng),是峰(fēng)寬擴(kuò)散(sàn)和聚焦(jiāo)同步過程的(dí)產(chǎn)物。
  聚(jù)焦機(jī)製(zhì)可想(xiǎng)象一(yī)個組(zǔ)分帶廣泛(fàn)擴(kuò)散在高(gāo)效液相色譜(pǔ)柱(zhù)的頂部。當施加(jiā)溶劑梯(tī)度時,帶後(hòu)部的有(yǒu)機(jī)溶劑濃(nóng)度總是高於帶(dài)前部。帶(dài)前的(dí)組分分子(zǐ)比帶後的(dí)組分(fēn)分子(zǐ)更強地被固定相(xiāng)保(bǎo)留(liú),帶後(hòu)的成(chéng)分分子(zǐ)更快(kuài)移動,導(dǎo)致落後的組分分子(zǐ)會(huì)被更(gēng)強的洗脫(tuō)液(yè)聚集(jí),並更(gēng)快(kuài)地向前移(yí)動以(yǐ)趕上(shàng)其餘的。
  帶聚焦機製可聚(jù)焦流(liú)動相(xiāng)中存在的有(yǒu)機雜質(zhì)。在低洗脫劑濃度(dù)下(xià)有一定(dìng)保留的(dí)雜(zá)質可能(néng)會(huì)隨(suí)著梯(tī)度逐(zhú)漸(jiàn)聚集(jí)成(chéng)峰。在(zài)充分聚(jù)焦後(hòu),流動相鬼峰與(yǔ)分析物(wù)峰形(xíng)接近或相同,聚(jù)焦不(bù)*時,它們會變得(dé)更(gēng)寬(kuān)或(huò)變成其(qí)他(tā)形狀。理(lǐ)想梯(tī)度的液相色(sè)譜(pǔ)流(liú)動相(xiāng)到達梯(tī)度(dù)最大(dà),該(gāi)處應(yīng)僅包含預期(qī)的(dí)溶(róng)劑和試劑,不(bù)包含其(qí)他物(wù)質。梯度高(gāo)效液(yè)相色譜分析的(dí)不隻是樣(yàng)品(pǐn),也(yě)分析流(liú)動相的(dí)雜質(zhì)和(hé)儀(yí)器路徑(jìng)的溶(róng)劑(jì)。為了區分(fēn)真實(shí)的(dí)分(fēn)析物(wù)峰(fēng)和這些(xiē)鬼峰(fēng),必須進行空白進樣的(dí)檢查(溶(róng)劑空白)。

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