葛(gé)根(gēn)為豆(dòu)科植物(wù)野葛(gé) Pueraria lobata (Willd.) Ohwi的幹燥根(gēn),是常用(yòng)中藥(yào)材(cái),具有(yǒu)解(jiě)肌(jī)退熱，生津，透疹，升(shēng)陽止瀉功效(xiào)，用於(yú)外感發熱(rè)頭痛(tòng)，項背強痛(tòng)，口(kǒu)渴(kě)，消(xiāo)渴，麻(má)疹不透(tòu)，熱痢，泄(xiè)瀉，高(gāo)血壓頸(jǐng)項強痛等[1]。現代研(yán)究證實，葛根中的主要(yào)有(yǒu)效(xiào)成(chéng)分為(wéi)葛(gé)根素(sù)等異(yì)黃(huáng)酮類(lèi)化合物(wù)，具有抗(kàng)炎解熱(rè)，擴(kuò)張(zhāng)冠(guān)狀動脈血管(guǎn)，增加(jiā)冠(guān)狀(zhuàng)動脈(mài)血(xiě)流量(liáng)的作(zuò)用，同時(shí)也有降低血(xiě)壓(yā)的作(zuò)用(yòng)。有(yǒu)關葛根中葛根(gēn)素(sù)等異(yì)黃(huáng)酮的(dí)含量測定研究已(yǐ)有(yǒu)不(bù)少報(bào)道(dào)[2-5]，但(dàn)對葛粉中葛根(gēn)素含量測定報道不(bù)多。本文(wén)對(duì)葛(gé)粉中葛根(gēn)素(sù)的提(tí)取條件(jiàn)和(hé)測(cè)試(shì)條(tiáo)件等進(jìn)行(háng)比(bǐ)較研(yán)究(jiū),並采用液相色(sè)譜法對葛粉樣(yàng)品進行了定(dìng)量(liáng)分析, 結果(guǒ)令人滿(mǎn)意。

  　 1 實(shí)驗(yàn)部分

  　 1.1 儀(yí)器與試劑

  　 LC－10tvp液(yè)相色(sè)譜儀(yí)；SPD－10T紫外(wài)檢測(cè)器；N2010色(sè)譜工(gōng)作(zuò)站，島津UV－265紫外(wài)分(fēn)光光(guāng)度儀(yí)，多功能榨汁機/攪(jiǎo)拌(bàn)機(jī)SG300－I。甲(jiǎ)醇（色(sè)譜純(chún)），水(shuǐ)（二次(cì)蒸(zhēng)餾(liù)），其餘均為分析純(chún)。葛(gé)根素對照品(pǐn)（中國藥(yào)品生物製品檢(jiǎn)定所）；鮮葛(gé)。

  　 1.2 色譜條件

  　用十八烷(wán)基矽(guī)烷鍵(jiàn)合矽(guī)膠為填(tián)充劑；色(sè)譜(pǔ)柱(zhù)Vertex C18 (150×4.6mm I.D)，MeOH－H2O－HAc（30：70：0.5）為(wéi)流(liú)動相，紫(zǐ)外檢(jiǎn)測(cè)波長250nm。

  　 2 結果(guǒ)與討(tǎo)論

  　 2.1 提(tí)取(qǔ)溶劑(jì)濃(nóng)度(dù)的(dí)選(xuǎn)擇

  　精密稱取(qǔ)同一(yī)樣品約(yuē)0.1g,分別加(jiā)30%乙醇，50%乙(yǐ)醇和80%乙醇10ml，超聲提取60分(fēn)鐘，進(jìn)樣5ul,比(bǐ)較(jiào)峰麵積，實(shí)驗結(jié)果表(biǎo)明(míng)30%乙醇提取。

  　 2.2 超聲提(tí)取(qǔ)時間的(dí)選(xuǎn)擇(zé)

  　精密(mì)稱取(qǔ)同一(yī)樣品(pǐn)約0.1g,分別(bié)加30%乙醇10ml，超聲(shēng)提(tí)取(qǔ)30分(fēn)鐘，45分鐘(zhōng)，60分鐘，進樣(yàng)5ul,比較峰(fēng)麵(miàn)積，實驗結果(guǒ)表(biǎo)明超聲(shēng)60分鐘(zhōng)為(wéi)*提取條件(jiàn)。

  　 2.3 流(liú)動(dòng)相(xiāng)及流速(sù)的選擇

  　 試驗時曾(zēng)采(cǎi)用下述(shù)流動(dòng)相(xiāng)進行測定(dìng)：甲(jiǎ)醇－水（25：75），甲(jiǎ)醇(chún)－水－醋(cù)酸（30：70：0.5），甲(jiǎ)醇－水（30：70）為流動相(xiāng)，結(jié)果(guǒ)采(cǎi)用(yòng)甲醇(chún)－水(shuǐ)－冰醋(cù)酸（30：70：0.5）為流動相，樣品分(fēn)離(lí)好。而(ér)流速(sù)也以1.0ml/min為合適。

  　 2.4 標(biāo)樣溶液(yè)的製(zhì)備(bèi)

  　稱取一定量葛根素對(duì)照品,用30%乙(yǐ)醇溶解配(pèi)製(zhì)成濃(nóng)度為(wéi)13ug/ml的(dí)葛(gé)根(gēn)素標(biāo)準液。

  　 2.5 葛粉製(zhì)備

  　取鮮(xiān)葛(gé)用水(shuǐ)洗淨(jìng)切片,稱取(qǔ)20g放入(rù)攪拌(bàn)機(jī)內(nèi)，攪(jiǎo)拌三次(cì)，每(měi)次1分鐘，每(měi)次加水(shuǐ)200ml， 150ml，100ml，合並漿汁放置二天，去(qù)掉上(shàng)麵的水(shuǐ)，下麵的粉(fěn)漿(jiāng)用定量濾紙過(guò)濾，低溫幹燥(zào)，放入(rù)幹燥器中備(bèi)用(yòng)。

  　 2.6 供試品溶液製備

  　稱取一定量葛粉(fěn)於(yú)10mL容量瓶中(zhōng),加30%乙(yǐ)醇(chún)10ml,超聲提(tí)取1h,濾紙(zhǐ)過濾,濾(lǜ)液過0.45um濾(lǜ)膜(mó)作為(wéi)供(gōng)試品溶液。

  　 2.7 綫(xiàn)性關係考察(chá)

  　 在(zài)上述(shù)色譜(pǔ)條件下(xià)，分別(bié)進標(biāo)樣溶(róng)液(yè)0.5，3，5，7，10μl，測得(dé)各峰麵積。以(yǐ)葛根(gēn)素(sù)為(wéi)橫(héng)座(zuò)標（A），以峰(fēng)麵積（Y）為(wéi)縱座標，計(jì)算得回歸方程：Y=3.90×106x+728.14,相(xiāng)關(guān)係數r＝0.9999；結(jié)果紫外(wài)檢(jiǎn)測葛根(gēn)素在0.0065-0.13μg範(fàn)圍內(nèi)呈良(liáng)好綫性關(guān)係。

  　 2.8 精密度試驗

  　取上述標樣(yàng)溶(róng)液(yè)，連續(xù)進(jìn)樣(yàng)5次，測(cè)定，RSD為(wéi)1.11%。

  　 2.9 重復性試(shì)驗(yàn)

  　取同一樣品(pǐn)重(zhòng)復測定(dìng)5次(cì)，RSD為1.61%。

  　 2.10 穩定性(xìng)試驗(yàn)

  　取上述供(gōng)試品溶(róng)液，0，2，5，7，10h進樣，RSD為2.1%，10小時內進樣(yàng)穩定(dìng)。

  　 2.11 回(huí)收(shōu)率試(shì)驗

  　 取(qǔ)已(yǐ)知(zhī)含(hán)量的(dí)樣品，分別加(jiā)入(rù)葛根素標樣，按上述(shù)方(fāng)法(fǎ)測定5次，平(píng)均回(huí)收率為98.6%, RSD為1.76%。見表1。

  　 2.12 樣品分析

  　精(jīng)密吸取標樣溶(róng)液(yè)5μl與供試品(pǐn)溶(róng)液5μl，注(zhù)入(rù)液相(xiāng)色(sè)譜儀，測定，結果(guǒ):葛(gé)粉(fěn)中葛(gé)根素的(dí)含量為(wéi)0.06%（n=3），見下圖。

  　 3 討(tǎo)論(lùn)

  　本(běn)文采用液相(xiāng)色譜法(fǎ)測定(dìng)葛粉(fěn)中葛(gé)根(gēn)素(sù)的(dí)含(hán)量(liáng),方法(fǎ)簡單，快(kuài)速，準(zhǔn)確(què)，結果滿意，可用於葛(gé)粉中(zhōng)葛根素(sù)的含量(liáng)測(cè)定。