HPLC分析(xī),尤(yóu)其(qí)是正相色譜(pǔ)的(dí)分析(xī)受(shòu)溫(wēn)度(dù)的影響特別大,反相分(fēn)析一(yī)般受影響(xiǎng)不(bù)大,有些(xiē)物(wù)質的分析(xī)必須在(zài)固定的(dí)溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng)。之前用鈣柱(zhù)做過葡(pú)萄糖的(dí)分(fēn)析,要求必(bì)須(xū)柱(zhù)溫85度(dù)。
而在色譜定性(xìng)方法(fǎ)中,柱溫(wēn)變化(huà)對定性(xìng)結(jié)果(guǒ)的(dí)影(yǐng)響(xiǎng)如下:
①當采用(yòng)絕對(duì)保(bǎo)留(liú)值定性時(shí),其(qí)他色(sè)譜(pǔ)條(tiáo)件不(bù)變,柱(zhù)溫變化(huà)時,保留(liú)時間就會發生(shēng)變化(huà),這樣就(jiù)直接影(yǐng)響定性結(jié)果判斷(duàn)。
②當(dāng)采用相對保留值α定性時(shí),α隻是(shì)柱溫(wēn)和固定液的函數,隻與待測組(zǔ)分(fēn)的熱(rè)力學性質(zhì)有關,消除了外界(jiè)因(yīn)素(sù)的(dí)影響,因此(cǐ)跟柱溫(wēn)變化關係(xì)不(bù)大,但是柱(zhù)溫(wēn)變化影(yǐng)響(xiǎng)判(pàn)斷(duàn)結果(guǒ)。
③當(dāng)采用(yòng)保留(liú)指數(shù)定性(xìng)時(shí),恒溫分析,保(bǎo)留指數與(yǔ)保留(liú)時(shí)間有關,而(ér)柱(zhù)溫(wēn)影響保留時(shí)間變化;程(chéng)序升溫(wēn)分析,除(chú)了(liǎo)保(bǎo)留時(shí)間,保(bǎo)留指(zhǐ)數(shù)還與保(bǎo)留溫(wēn)度(dù)有(yǒu)關。因此,這種定(dìng)性方(fāng)法易(yì)受(shòu)柱溫變(biàn)化影(yǐng)響。
④當采用(yòng)純(chún)樣(yàng)疊加法(fǎ)定性(xìng)時,已知混(hùn)合物(wù)中含某組分(fēn),將該(gāi)組(zǔ)分的(dí)純(chún)樣加(jiā)入(rù),觀(guān)察(chá)加(jiā)入(rù)前後(hòu)的(dí)響應信號變化。柱溫變化(huà),保(bǎo)留時間(jiān)變化,但(dàn)是加入前(qián)後(hòu)的樣品影(yǐng)響信(xìn)號(hào)變(biàn)化是一致的,因此(cǐ)柱(zhù)溫變化不(bù)影(yǐng)響采用這種(zhǒng)方法定(dìng)性(xìng)的結(jié)果(guǒ)。
而(ér)在定量計(jì)算(suàn)時(shí),經常要用(yòng)到校正(zhèng)因(yīn)子,如(rú)重量校(xiào)正(zhèng)因子(zǐ),和組分的(dí)質(zhì)量以(yǐ)及響應信號(hào)有關。柱(zhù)溫變化,峰(fēng)高變化,峰(fēng)麵(miàn)積(jī)不變,因(yīn)此(cǐ),在(zài)柱(zhù)溫變(biàn)化不影(yǐng)響峰形正常(cháng)的前(qián)提下,以(yǐ)峰(fēng)高為(wéi)響(xiǎng)應(yīng)信號的重量(liáng)校正(zhèng)因(yīn)子(zǐ),受柱(zhù)溫影響(xiǎng),而以(yǐ)峰(fēng)麵積為(wéi)響應信號的重量校正因子(zǐ)將(jiāng)不(bù)受影(yǐng)響(xiǎng)。常見定量方法中(zhōng),在(zài)柱溫(wēn)波動不影響出峰效果(guǒ)的前(qián)提(tí)下,對(duì)定量結果(guǒ)的(dí)影(yǐng)響如(rú)下(xià):
①采用歸一化法(fǎ)時(shí),定量時需(xū)要各(gè)組分的(dí)校正因(yīn)子,當(dāng)以(yǐ)峰麵積(jī)為(wéi)響(xiǎng)應(yīng)信號(hào)時(shí),定量(liáng)結果不(bù)受(shòu)影響,以峰高為響應信(xìn)號則受(shòu)影響。
②采(cǎi)用內(nèi)標法(fǎ)時(shí),需要(yào)計算(suàn)定(dìng)量校正(zhèng)因子,影響規律和①同(tóng)。
③采用外標法時,即標準曲(qū)綫法(fǎ),當以(yǐ)峰(fēng)麵(miàn)積(jī)為(wéi)響(xiǎng)應(yīng)信號時,不受影響(xiǎng),但(dàn)是(shì)當以峰高為(wéi)響應信(xìn)號時,影響(xiǎng)很大(dà)。
總(zǒng)之,柱(zhù)溫(wēn)變化(huà)可(kě)能會導致定性,定量(liáng)分析結(jié)果(guǒ)的變(biàn)化。