色(sè)譜法是(shì)一種(zhǒng)非自發(fā)，需耗能(néng)(由(yóu)高壓氣(qì)體或液(yè)體提(tí)供(gōng))的分(fēn)離方(fāng)法。被檢樣品(pǐn)混合物(wù)中的不同組分與互(hù)不相(xiāng)溶(róng)的(dí)流動相( mobile phase)和(hé)固(gù)定相(xiāng)( stationary phase)之間(jiān)的吸附，溶解，分配或離子交換等(děng)相(xiāng)互(hù)作(zuò)用是存在(zài)著(zhuó)差異的(dí),當流動(dòng)相攜(xié)帶著(zhuó)多組(zǔ)分(fēn)混(hùn)合物流(liú)過(guò)固定(dìng)相時,使(shǐ)得(dé)性質不(bù)同的(dí)各個(gè)組分(fēn)隨流(liú)動(dòng)相(xiāng)移(yí)動(dòng)的(dí)速度(dù)產生(shēng)了(liǎo)差異,隨著組(zǔ)分在(zài)兩相之間持續發生反復(fù)多次(cì)的作用,原來微小的(dí)差(chà)異(yì)累(léi)加(jiā)產生(shēng)了很(hěn)大的效(xiào)果,從(cóng)而(ér)使(shǐ)各(gè)組分(fēn)在(zài)柱(zhù)內(nèi)移動的(dí)同(tóng)時逐(zhú)漸(jiàn)分離(lí)。

例如某(mǒu)含A，B兩(liǎng)個組(zǔ)分的試(shì)樣,已(yǐ)知A組分(fēn)在(zài)固定相(xiāng)中(zhōng)的分(fēn)配(pèi)係(xì)數(shù)(即(jí)與(yǔ)固(gù)定相的作用力)大於B,當(dāng)樣(yàng)品(pǐn)由(yóu)流動相攜帶進入(rù)填充(chōng)有固定相的(dí)色譜柱(zhù)頭時(shí)(如圖1-3所(suǒ)示),組分A，B是*相(xiāng)混的。由於(yú)A組分在固定(dìng)相(xiāng)中的溶解能(néng)力比(bǐ)B大(dà),故A組(zǔ)分(fēn)的移(yí)動(dòng)速(sù)度慢,經過多次反復分配(pèi)後,分配(pèi)係數(shù)較小(xiǎo)的B組(zǔ)分(fēn)首先(xiān)被帶出色譜(pǔ)柱,而(ér)分配(pèi)係(xì)數較大的組分(fēn)A則遲(chí)被帶(dài)出(chū)色(sè)譜柱,從而實(shí)現(xiàn)了分離(lí)。

在經典(diǎn)色譜(pǔ)分(fēn)離中(zhōng),從色(sè)譜柱後(hòu)流出(chū)的各組(zǔ)分(fēn)用(yòng)容器一(yī)一收集(jí)後,供進(jìn)一步(bù)的(dí)分(fēn)析或使(shǐ)用。而在現代(dài)色譜(pǔ)儀器分(fēn)析(xī)中,從(cóng)色譜柱流出的被(bèi)分(fēn)離(lí)了的組分被(bèi)流動相“在(zài)綫(xiàn)”導(dǎo)入(rù)檢(jiǎn)測器,將各組(zǔ)分的濃(nóng)度變化用電壓(yā)，電(diàn)流信(xìn)號記錄(lù)下(xià)來,直接(jiē)對每(měi)個組分(fēn)進行(háng)定性和(hé)定量分(fēn)析(xī)。