HPLC常見(jiàn)問(wèn)題(tí)的解(jiě)答

　　一，問(wèn):用(yòng)HPLC進行分析(xī)時保(bǎo)留(liú)時間有(yǒu)時發生漂移
，有時發生快(kuài)速(sù)變(biàn)化(huà)
，原(yuán)因(yīn)何在(zài)？如何解(jiě)決(jué)？

　　答:關於漂移(yí)問題：

　　1． 溫(wēn)度控製(zhì)不好
，解(jiě)決(jué)方(fāng)法是采(cǎi)用恒溫(wēn)裝置
，保(bǎo)持柱溫(wēn)恒定

　　2． 流(liú)動相發生變化
，解決辦法是防止流(liú)動(dòng)相發生(shēng)蒸(zhēng)發，反應等

　　3． 柱子未平衡好(hǎo)
，需對(duì)柱(zhù)子(zǐ)進(jìn)行更(gēng)長時間的(dí)平衡

　　關(guān)於快速(sù)變化(huà)問(wèn)題

　　1． 流(liú)速(sù)發(fā)生變化
，解決(jué)辦法是(shì)重新設定(dìng)流速(sù)
，使之(zhī)保(bǎo)持(chí)穩定

　　2． 泵中有氣泡
，可(kě)通(tōng)過排氣等(děng)操作(zuò)將(jiāng)氣(qì)泡趕(gǎn)出。

　　3． 流動相不(bù)合(hé)適
，解決(jué)辦(bàn)法(fǎ)為(wéi)改(gǎi)換流動(dòng)相或(huò)使流(liú)動(dòng)相(xiāng)在(zài)控製室(shì)內進行(háng)適當混合

　　二(èr)，問:液相色(sè)譜(pǔ)中峰(fēng)出(chū)現(xiàn)拖尾(wěi)或出(chū)現雙峰(fēng)的(dí)原因是(shì)什麼(mó)？</B>

　　答: 1． 篩板(bǎn)堵(dǔ)塞(sāi)或柱失效(xiào)
，解(jiě)決辦法(fǎ)是反(fǎn)向衝(chōng)洗柱子
，替換篩板(bǎn)或更換柱子。

　　2． 存(cún)在幹(gān)擾(rǎo)峰(fēng)
，解決辦法(fǎ)為使用較長的柱子
，改(gǎi)換流(liú)動相或更換(huàn)選擇(zé)性好(hǎo)的柱(zhù)子(zǐ)

　　三，問(wèn)：HPLC靈(líng)敏度(dù)不夠(gòu)的主要原因(yīn)及(jí)解決辦法(fǎ)</B>

　　答(dá): 1． 樣品(pǐn)量不足
，解決辦法為(wéi)增加樣品量(liáng)

　　2． 樣品未從(cóng)柱子(zǐ)中流(liú)出(chū)。可(kě)根(gēn)據樣品的化(huà)學(xué)性質(zhì)改變流(liú)動相或柱子

　　3． 樣品與檢測器不匹(pǐ)配。根據樣(yàng)品化學(xué)性質調整(zhěng)波(bō)長(cháng)或(huò)改(gǎi)換檢測器(qì)

　　4． 檢測器(qì)衰減太多(duō)。調整衰(shuāi)減即可(kě)。

　　5． 檢測器時間(jiān)常(cháng)數(shù)太(tài)大。解決(jué)辦法為降低(dī)時間(jiān)參數(shù)

　　6． 檢測(cè)器(qì)池窗(chuāng)汙(wū)染(rǎn)。解決(jué)辦法(fǎ)為清洗池窗(chuāng)。

　　7． 檢(jiǎn)測池中(zhōng)有氣泡。解決辦法為排氣(qì)。

　　8． 記錄儀測壓範(fàn)圍不當。調(tiáo)整(zhěng)電壓範(fàn)圍(wéi)即(jí)可(kě)。

　　9． 流(liú)動(dòng)相(xiāng)流(liú)量不合適。調(tiáo)整流速(sù)即可(kě)。

　　10． 檢(jiǎn)測器(qì)與(yǔ)記(jì)錄儀超出校(xiào)正曲(qū)綫。解決(jué)辦法(fǎ)為檢(jiǎn)查(chá)記(jì)錄(lù)儀與檢測(cè)器
，重(zhòng)作校(xiào)正曲綫(xiàn)。

　　四，問：做(zuò)HPLC分析時(shí)
，柱(zhù)壓不穩(wěn)定(dìng)
，原因何在？如何(hé)解(jiě)決(jué)？</B>

　　答(dá)：原因(yīn)可(kě)能有：

　　1． 泵內(nèi)有(yǒu)空(kōng)氣(qì)
，解決(jué)的辦法是清除(chú)泵內空氣
，對(duì)溶劑進(jìn)行(háng)脫氣(qì)處理；

　　2． 比(bǐ)例(lì)閥失效(xiào)
，更換比例閥(fá)即可(kě)；

　　3． 泵(bèng)密封(fēng)墊(diàn)損(sǔn)壞
，更(gēng)換密封墊即可(kě)；

　　4． 溶劑(jì)中的氣(qì)泡
，解決的(dí)辦法是(shì)對溶劑脫氣
，必(bì)要時改變(biàn)脫氣方法；

　　5． 係(xì)統檢漏
，找(zhǎo)出(chū)漏點(diǎn)
，密封即可(kě)；

　　6． 梯度(dù)洗脫
，這時(shí)壓力波(bō)動是(shì)正常(cháng)的(dí)。

　　五，問：我(wǒ)購買的(dí)HPLC柱(zhù)驗收測試時柱壓過(guò)高
，請(qǐng)問(wèn)為(wéi)什麼(mó)？</B>

　　答(dá)：柱(zhù)壓過高是HPLC柱用戶常(cháng)碰(pèng)到(dào)的問題(tí)。其(qí)原因有多方麵(miàn)
，而且(qiě)常(cháng)常並(bìng)不是柱子(zǐ)本身的(dí)問(wèn)題
，您(nín)可按(àn)下麵(miàn)步(bù)驟檢查(chá)問(wèn)題的(dí)起因(yīn)。

　　1． 拆去(qù)保(bǎo)護(hù)預(yù)柱(zhù)
，看(kàn)柱(zhù)壓是(shì)否(fǒu)還高
，否則(zé)是(shì)保護(hù)柱的問題
，若柱(zhù)壓(yā)仍(réng)高
，再檢(jiǎn)查；

　　2． 把色(sè)譜柱從儀器(qì)上取下(xià)
，看(kàn)壓(yā)力(lì)是否(fǒu)下降
，否(fǒu)則是(shì)管路(lù)堵塞
，需清洗
，若壓力(lì)下降(jiàng)
，再(zài)檢查；

　　3． 將柱子(zǐ)的進出口反過(guò)來(lái)接(jiē)在(zài)儀器上(shàng)
，用10倍柱體積的(dí)流動(dòng)相(xiāng)衝洗柱子
，（此(cǐ)時不(bù)要(yào)連接檢測器
，以(yǐ)防固體顆(kē)粒進入流(liú)動(dòng)池(chí)）。這時
，如(rú)果柱壓仍不(bù)下(xià)降
，再(zài)檢查；

　　4． 更(gēng)換(huàn)柱(zhù)子(zǐ)入(rù)口(kǒu)篩(shāi)板(bǎn)
，若柱(zhù)壓(yā)下(xià)降(jiàng)
，說(shuō)明您的溶劑(jì)或(huò)樣(yàng)品含有顆粒(lì)雜(zá)質(zhì)
，正是這(zhè)些(xiē)雜質將篩(shāi)板(bǎn)堵塞(sāi)引起壓力上(shàng)升。若柱(zhù)壓還高(gāo)
，請(qǐng)與廠(chǎng)商聯係(xì)。 一(yī)般情(qíng)況下
，在進(jìn)樣(yàng)器與保(bǎo)護柱之間接一(yī)個(gè)在綫過濾(lǜ)器便可避免(miǎn)柱(zhù)壓(yā)過高的問(wèn)題