摘要(yào)：在食品安全(quán)檢測方(fāng)法(fǎ)中(zhōng)，氣相(xiāng)色譜(pǔ) 技(jì)術(shù)是(shì)十分重要(yào)的檢測(cè)技術之一(yī)。它具有(yǒu)操(cāo) 作(zuò)快速，簡便(biàn)，準確(què)及(jí)分(fēn)離效(xiào)果(guǒ)好(hǎo)等(děng)優(yōu)點， 因此本(běn)文為反(fǎn)式脂肪(fáng)酸的(dí)研究提供(gōng)了一(yī)種切 實可(kě)行的分(fēn)析方法。

　　關(guān)鍵詞：食品(pǐn)檢(jiǎn)測；氣(qì)相色譜(pǔ)技(jì)術；反式(shì)脂肪酸
　　，材(cái)料與(yǔ)方法 1.1儀(yí)器(qì)與試(shì)劑(jì)
　　氣相色(sè)譜儀(yí)，C-R7Ae數(shù)據(jù)處(chǔ)理機，OPGU-1500S氫(qīng)氣發(fā)生器。脂肪(fáng)酸甲(jiǎ)脂標準品：Sigma公司(sī)產(chǎn)品，共(gòng)18種；其(qí)中 飽和脂(zhī)肪(fáng)酸甲酯(zhǐ)有C10:0,C12: 0, C14:0, C16:0, C17:0, C18:0, C20:0, C22:0和(hé) C24: 0共(gòng)9種(zhǒng);不(bù)飽(bǎo)和脂(zhī)肪酸甲(jiǎ)酯(zhǐ)有(yǒu)C16: 1n-9 (trans), C16:1n-9 (cis), C18：1n- 6(cis),C18:1n-9(cis),C18:1n-11(cis), C18:1n-9 (trans), C18:1n-11 (trans), C18: 2n-9, 12(cis)和(hé)C18 : 2n-9, 12 (trans)共 9種(zhǒng)。以正己烷(wán)為(wéi)溶劑(jì)，製(zhì)成約(yuē)0. 4mg/ml的標 準液(yè)。試劑：正(zhèng)己(jǐ)烷(wán)，*，氯化(huà)鈉，甲 醇，3氟化(huà)硼，均為分析純(chún)。樣品(pǐn)選(xuǎn)用黃(huáng)油， 全(quán)脂奶粉(fěn)和人(rén)造奶油(yóu)。 1.2色譜條件
　　選用CP-Sil88FAME毛細(xì)管(guǎn)石英柱（100mX 0.25irnX0.20Wm),FID檢測(cè)器,載氣(qì)為高純氮 氣(qì)，壓(yā)力(lì)為300Wa,氫氣(qì)壓力50kPa,空(kōng)氣(qì)壓(yā)力 50Wa);進樣(yàng)口溫度250。C,檢測器(qì)溫(wēn)度(dù)260。C; 柱溫采用(yòng)三(sān)級程序(xù)升溫(wēn)：初(chū)始溫(wēn)度(dù)110。C,保持(chí) 4min;以3°C/min升溫(wēn)至(zhì)170°C;再以2°C/min升 溫(wēn)至(zhì)200。C;zui後(hòu)再(zài)以(yǐ)3。C/min升溫(wēn)至(zhì)230。C,保(bǎo) 持6min。分(fēn)流比為(wéi)1:40。 1.3樣品(pǐn)甲酯(zhǐ)化
　　一般食品按照GB/T5009. 6食(shí)品中(zhōng)脂肪的(dí) 測(cè)定方(fāng)法進(jìn)行(háng)脂(zhī)肪提(tí)取。乳(rǔ)及乳製品則(zé)按照(zhào) 方法GB/T5009.46提脂(zhī)。取適量提取的脂(zhī)肪或(huò) 油脂(zhī)樣品直(zhí)接按照(zhào)GB/T17376-1998中(zhōng)的方(fāng)法 製備動植(zhí)物油脂(zhī)的脂肪酸(suān)甲(jiǎ)酯，即先(xiān)用適量(liáng)氫(qīng) 氧(yǎng)化鈉甲(jiǎ)醇溶液(yè)回流後(hòu)加入12%?15%的(dí)3氟(fú) 化(huà)硼(péng)甲(jiǎ)醇溶液，再(zài)回(huí)流，加(jiā)入(rù)正己(jǐ)烷和(hé)飽和(hé)氯 化(huà)鈉溶液，振(zhèn)蕩萃(cuì)取(qǔ)後取(qǔ)正己(jǐ)烷層於氣相(xiāng)色譜(pǔ) 上(shàng)分析。
　　，結(jié)果(guǒ)

　　順，反(fǎn)式脂肪(fáng)酸(suān)的(dí)分離(lí)情況(kuàng) 由圖1脂(zhī)肪酸(suān)甲酯(zhǐ)標準品色(sè)譜(pǔ)圖可見，大(dà) 部分飽(bǎo)和脂(zhī)肪酸之(zhī)間，飽和脂(zhī)肪(fáng)酸與(yǔ)不(bù)飽和 脂(zhī)肪酸之(zhī)間，不飽和脂(zhī)肪酸中(zhōng)的(dí)順式(shì)與反(fǎn)式 之間(jiān)都分離(lí)得(dé)很好，隻(zhī)有(yǒu)脂肪(fáng)酸甲酯C18:1n- 6(cis)，C18:1n-9(cis)和(hé)C18:1n-11(cis) 之(zhī)間，以(yǐ)及脂(zhī)肪(fáng)酸甲酯C18:1n-9(trans)和 C18:1n-11(trans)之間(jiān)分(fēn)離不夠理想(xiǎng)，*滿(mǎn) 足檢測(cè)要求。
　　綫性範圍(wéi)和(hé)檢(jiǎn)出(chū)限(xiàn)
　　選(xuǎn)用(yòng)脂肪酸(suān)C16:0甲酯和(hé)脂(zhī)肪(fáng)酸(suān)C18:0甲 酯(zhǐ)標準品，配(pèi)製(zhì)成濃度(dù)0.050?1.500mg/m的混 合標(biāo)準液。脂(zhī)肪(fáng)酸C16:0甲酯(zhǐ)的綫(xiàn)性回歸方(fāng)程 Y=565413X+1124(r=0.997,n=5);脂肪(fáng)酸C18:0 甲(jiǎ)酯的(dí)綫性(xìng)回(huí)歸方程Y=577448X+1371 (r=0. 9 98, n=5)；以(yǐ)基綫噪(zào)聲的(dí)2倍所(suǒ)對應的(dí)濃(nóng)度為 方法的檢出限，脂(zhī)肪(fáng)酸C16:0甲酯的檢出限為 8.1wg/ml，脂肪酸C18:0甲(jiǎ)酯(zhǐ)為8.9wg/m,l *可(kě)以(yǐ)滿(mǎn)足(zú)檢測要(yào)求。 2.3加(jiā)標(biāo)回收(shōu)試驗(yàn)
　　取(qǔ)同一人(rén)造(zào)奶(nǎi)油(yóu)樣(yàng)品提(tí)取(qǔ)的脂肪2份，分(fēn) 別(bié)選擇2個(gè)水平(píng)，加(jiā)入脂肪(fáng)C18:1n-9(cis)甲 酯(zhǐ)標準(zhǔn)品(pǐn)和脂(zhī)肪酸(suān)C18:1n-9(trans)甲酯(zhǐ)標準 品，毎(měi)個(gè)水平檢測(cè)兩次(cì),檢(jiǎn)測結果取均值，回收(shōu) 率為98.33%?100.6%。見表1。 2.4反式油(yóu)酸(suān)含(hán)量的檢測 通(tōng)過檢(jiǎn)測，黃油和人(rén)造(zào)奶(nǎi)油(yóu)檢測到(dào)了反式 脂(zhī)肪酸，以外標法進(jìn)行(háng)定量分析，4種(zhǒng)樣品的 分析(xī)結果(guǒ)見(jiàn)表2。 表(biǎo)2 4種.

　　反式(shì)脂肪酸的(dí)來源 3.1.1反芻動(dòng)物脂肪及其乳(rǔ)脂 反(fǎn)芻動物（如(rú)牛，羊，馬等(děng)）的脂(zhī)肪(fáng)組(zǔ)織 和乳及(jí)乳製品，反芻動物(wù)體(tǐ)內(nèi)脂經其(qí)體(tǐ)內微(wēi)生(shēng) 物部(bù)分(fēn)氫(qīng)化作(zuò)用而(ér)產生少量(liáng)反式不飽和(hé)脂肪(fáng) 酸，反芻(chú)動(dòng)物體(tǐ)脂中TFAs的(dí)含量(liáng)占(zhān)總(zǒng)脂肪(fáng)酸(suān) 的4%11%,牛(niú)奶，羊奶中(zhōng)的(dí)含量(liáng)占總脂肪的 33%?5%。
　　氫(qīng)化(huà)加工的植物油(yóu)脂(zhī) 天然(rán)油(yóu)脂(zhī)如：大(dà)豆油(yóu)，菜籽(zǐ)油，它(tā)們脂肪(fáng) 酸的(dí)存(cún)在形式是順(shùn)式結(jié)構(gòu),而在油(yóu)脂(zhī)的(dí)氫化(huà)過(guò) 程，油(yóu)脂(zhī)中(zhōng)不飽和的雙(shuāng)鍵(jiàn)轉變為(wéi)單(dān)鍵(jiàn)的(dí)同時(shí)， 則產生了部分異(yì)構(gòu)化的反式脂(zhī)肪酸(suān)。人(rén)造(zào)黃 油(yóu)，人造奶(nǎi)油，起酥油(yóu)等均屬於(yú)氫(qīng)化(huà)油脂，它(tā) 們(mén)中反式脂肪酸含量一般在5%?45%之(zhī)間(jiān)，zui 高(gāo)可(kě)達(dá)65%。當它(tā)們(mén)作為原料(liào)被添加到食品(pǐn)中(zhōng) 時,會(huì)使(shǐ)得食品中含有反(fǎn)式(shì)脂肪(fáng)酸(suān)。 3.2各(gè)種脂肪(fáng)酸(suān)的分(fēn)離情況(kuàng) 雖然脂肪酸C18:1n-9 (trans)和(hé)C18 ： 1n- 9(trans)兩(liǎng)者之(zhī)間(jiān)及(jí)脂肪(fáng)酸C18:1n-6(cis)，
　　和C18:1n-11(cis)三者(zhě)之(zhī)間分(fēn) 離不很*,但反式(shì)脂(zhī)肪(fáng)酸(suān)C18:1(trans)與順 式脂肪(fáng)酸C18:1(cis)之間(jiān)分(fēn)離尚好，可以滿足(zú) 反式脂(zhī)肪酸(suān)的(dí)檢測要求(qiú)。
　　脂(zhī)肪酸(suān)C10:0至C24 ： 0, 8種偶數(shù)碳飽和(hé)脂 肪(fáng)酸，由低碳數先，高碳數後極(jí)有規律地(dì)有(yǒu)序(xù) 出峰。某一同碳數的飽(bǎo)和脂(zhī)肪(fáng)酸的色(sè)譜峰位(wèi) 於不(bù)飽和(hé)脂肪(fáng)酸之前(qián)，如脂肪酸C16:0位於(yú)脂(zhī) 肪酸C16:1之(zhī)前(qián)；同碳(tàn)數(shù)的(dí)不飽和脂(zhī)肪酸(suān),烯(xī)鍵 少先(xiān)出峰(fēng),如脂(zhī)肪(fáng)酸C18: 1位於(yú)脂肪(fáng)酸C18: 2 之(zhī)前；順式，反(fǎn)式脂肪(fáng)酸的(dí)色譜峰(fēng)相(xiāng)鄰(lín)，反式 位(wèi)於順(shùn)式之前，如(rú)脂肪酸(suān)C16:1n-9(trans) 位(wèi)於(yú)脂肪酸C16:1n-9(cis)之前(qián)，脂肪(fáng)酸(suān) C18:1n-9 (trans)位(wèi)於(yú)脂肪(fáng)酸(suān)C18 ： 1n-9 (cis) 之前；同一異構(gòu)體的不飽(bǎo)和(hé)脂肪(fáng)酸，烯鍵位(wèi)於 碳原(yuán)子(zǐ)序數(shù)大的色(sè)譜峰居(jū)於(yú)序數(shù)小的之前。 3.3毛細管色譜(pǔ)柱的選擇 有(yǒu)實驗表(biǎo)明，色(sè)譜(pǔ)柱長短明顯影響各種(zhǒng)脂 肪(fáng)酸的分(fēn)離效果(guǒ)。選(xuǎn)用50m長色譜柱(zhù)，可(kě)以達(dá) 到各種飽(bǎo)和脂肪(fáng)酸，不飽(bǎo)和(hé)脂(zhī)肪(fáng)酸(suān)良好的分 離效(xiào)果。若要*分離檢測順(shùn)，反(fǎn)式脂肪酸， 應(yīng)采(cǎi)用100m長(cháng)色譜(pǔ)柱(zhù)。當然也(yě)不是柱越長越 好。
　　柱(zhù)溫(wēn)對實驗結果的影響 不(bù)同(tóng)的柱溫條(tiáo)件(jiàn)，會(huì)對(duì)反(fǎn)式(shì)脂肪(fáng)酸(suān)的(dí)色 譜(pǔ)峰分(fēn)離(lí)產生影(yǐng)響。按Subrama-niam等選 用(yòng)的(dí)柱溫(wēn)一級程序升溫(wēn)方法(fǎ)，脂肪酸C16:0與(yǔ) C20:0之間的出(chū)峰時間間(jiān)距(jù)太(tài)近，這(zhè)兩種脂肪 酸(suān)之(zhī)間的(dí)脂(zhī)肪(fáng)酸C16:1n-9(cis)，C16:1n- 9 (trans)，C18:0，C18: 1n-6(cis)， C18:1n-9(cis)， C18:1n-11(cis)， C18:1n- 6(trans)， C18:1n-9 (trans)， C18:1n- 9 (trans)，C18:2n-9. 12(cis)和C18:2n- 9.12(trans)等11種(zhǒng)脂肪酸過於擁擠，分(fēn)離效(xiào) 果不(bù)好。
　　采(cǎi)用(yòng)3級程(chéng)序升(shēng)溫方法，目的(dí)是在(zài)第(dì)二級(jí) 程(chéng)序(xù)升溫中降低色(sè)譜柱的(dí)升溫速(sù)度，擴(kuò)大脂肪(fáng) 酸(suān)C16:0與(yǔ)脂(zhī)肪(fáng)酸C20:0之間的(dí)出峰(fēng)時間間(jiān)距， 使得11種脂(zhī)肪(fáng)酸達到更好(hǎo)的(dí)分離(lí)。